二氧化碳搖床的消毒步驟

二氧化碳搖床（CO?培養(yǎng)箱）的消毒是確保細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無菌的關(guān)鍵步驟。以下是詳細(xì)的消毒步驟和注意事項(xiàng)：


一、消毒前準(zhǔn)備
1. 關(guān)閉設(shè)備
  斷開電源，關(guān)閉CO?氣源。
  取出培養(yǎng)箱內(nèi)的所有培養(yǎng)物、隔板、水盤等可拆卸部件。
2. 清潔表面污漬
  用中性洗滌劑或70%乙醇擦拭內(nèi)壁、門封和外部，去除可見污垢。
  頑固污漬可用無菌蒸餾水或溫和去垢劑處理，避免腐蝕性清潔劑。

二、消毒方法
# 1. 濕熱滅菌（高壓蒸汽）
  適用部件：可拆卸的隔板、水盤、支架等耐高溫部件。
  步驟：
1. 121℃高壓滅菌15 20分鐘。
2. *底干燥后再放回培養(yǎng)箱。
#2. 化學(xué)消毒
  常用消毒劑：
  70%乙醇：擦拭內(nèi)壁，作用5 10分鐘。
  過氧化氫（3 6%）：噴灑或擦拭，靜置30分鐘后用無菌水擦凈。
  季銨鹽類（如苯扎氯銨）：按說明書稀釋使用。
  步驟：
1. 噴灑或擦拭消毒劑，確保覆蓋所有角落。
2. 作用時(shí)間結(jié)束后，用無菌蒸餾水*底清除殘留。
# 3. 紫外線（UV）照射
  使用培養(yǎng)箱自帶的UV燈（若無則需外置UV燈）。
  照射時(shí)間：30分鐘至1小時(shí)（注意避開橡膠/塑料部件）。
  注意：UV穿透力有限，需配合其他消毒方式。
# 4. 高溫干熱滅菌（部分型號(hào)支持）
  設(shè)定140℃維持2小時(shí)（需確認(rèn)設(shè)備耐受性）。
  僅適用于無塑料/橡膠部件的空腔。

三、消毒后處理
1. 重新組裝
  安裝已滅菌的隔板、水盤（加入無菌水保持濕度）。
  檢查門封是否密封。
2. 預(yù)平衡環(huán)境
  開啟CO?和溫度至設(shè)定值（如37℃、5% CO?），穩(wěn)定24小時(shí)后再使用。
  可放置無菌PBS或培養(yǎng)基測試無菌性。
3. 驗(yàn)證消毒效果
  使用生物指示劑（如孢子試條）或定期微生物檢測。

四、注意事項(xiàng)
  個(gè)人防護(hù)：戴手套、口罩，避免消毒劑接觸皮膚。
  消毒劑選擇：避免含氯或強(qiáng)氧化劑腐蝕不銹鋼內(nèi)膽。
  頻率建議：
  常規(guī)消毒：每1 2個(gè)月一次。
  污染后：立即*底消毒。
  記錄：記錄消毒日期、方法和責(zé)任人。


五、常見問題
  霉菌污染：可先用5%碳酸氫鈉擦拭，再消毒。
  頑固生物膜：使用酶清潔劑預(yù)處理。
  氣味殘留：延長通風(fēng)時(shí)間或使用活性炭吸附。
通過規(guī)范操作和定期維護(hù)，可有效降低污染風(fēng)險(xiǎn)，確保細(xì)胞培養(yǎng)的可靠性。